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液相色谱仪——色谱柱的安装

发布时间:2020-05-12 13:43:47 丨 浏览次数:225

液相色谱由高压液体泵、检测器及液相色谱柱等三部分组成,其中液相色谱柱的正确安装和使用,是液相色谱工作的关键;也是液相色谱工作者获得正确可靠的实验数据的必经之路。

一、液相色谱柱的安装:

1液相色谱柱的结构:
a、空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成。
    柱接头采用低死体积结构,柱接头是两端螺纹组件,一端是为7/16英寸外螺纹,另一端是316英寸的内螺纹国内外已规范化716英寸外螺纹与14英寸柱管Φ6.35mm)连接,中间放置压坏用于密封。316英寸的内螺纹与116英寸Φ1.57mm)的连接管连接,中间也放置压环用于柱接头的密封。为了尽量减少柱外死体积,在安装色谱柱时,用Φ1.57mm连接管通过空心螺钉压环后要尽量插到底,然后再拧紧空心螺钉。压环被空心螺钉挤压变形后紧箍在连接管上连接管通过压环后露出的管长度应严格控制在25mm长或其他固定尺寸
    在两端柱接头内,柱管两端各放置一片不锈钢滤片或滤网,用于封堵柱填料不被流动相冲出柱外而流失。空柱各组件均为316#不锈钢材质,能耐受一般的溶剂作用。但由于含氯化物的溶剂对其有一定的腐蚀性,故使用时要注意,柱及连接管内不能长时间存留此类溶剂,以避免腐蚀。
b、柱填料:
    液相色谱柱的分离作用是在填料与流动相之间进行的,柱子的分类是依据填料类型而定。
    正相柱:多以硅胶为柱填料。根据外型可分为无定型和球型两种,其颗粒直径在3—10 μm的范围内。另一类正相填料是硅胶表面键合—CN-NH2等官能团即所谓的键合相硅胶。
    反相柱:主要是以硅胶为基质,在其表面键合十八烷基官能团ODS)的非极性填料。也有无定型和球型之分。
    常用的其他的反相填料还有键合C8C4C2、苯基等,其颗粒粒径在3—10 μm之间。

2、色谱柱的安装:
a、拆开柱包装盒,确认色谱柱的类型、尺寸、出厂日期以及柱内贮存的溶剂。
b、拧下柱两端接头的密封堵头放回包装盒供备用。
c 按柱管上标示的流动相流向,将色谱柱的入口端通过连接管与进样阀出口相连接如条件允许,建议在柱前使用保护柱;柱的出口与检测器连接。连接管是外径为1.57mm、内径为0.1-0.3mm的不锈钢管。连接管的两端均有空心螺钉及密封用压环。在接管时一定要设法降低柱外死体积。连接管通过空心螺钉、压环后尽量用力插到底,然后顺时针拧紧空心螺钉,直到拧不动为止,再用扳手继续顺时针拧14-12圈,切记不要用力过大。如色谱柱通过流动相加压后有漏液现象,请用扳手继续顺时针拧14圈,直至不漏液为止。


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